Trizol
TRIzol ist eine oft verwendete[1] Chemikalienlösung, die zur Extraktion von DNA (DNA-Extraktion), RNA (RNA-Extraktion) und Proteinen aus Zellen verwendet wird. Die Lösung wurde zuerst von Piotr Chomczyński und Nicoletta Sacchi im Jahr 1987 verwendet und publiziert.[2]
Funktion bei der Extraktion
[Bearbeiten | Quelltext bearbeiten]Der korrekte Name der Methode ist die Guanidiniumthiocyanat-Phenol-Chloroform-Extraktion. TRIzol ist der Markenname von Guanidiniumthiocyanat von Ambion (Teil von Life Technologies), TRI Reagent ist der Markenname von MRC, der Firma die Chomczynski gegründet hat. Mit TRIzol werden ähnliche DNA-Ausbeuten wie bei anderen Methoden erreicht, während die RNA-Ausbeute über 50 % größer sein kann.[3][4]
Eine alternative Methode der RNA-Extraktion ist die Phenol-Extraktion und TCA-/Aceton-Präzipitation. Bei dieser sollte Chloroform durch 1-Brom-3-chlorpropan ersetzt werden, wenn die neue Generation der TRI-Reagenz verwendet wird. DNA und RNA können aus TRIzol-/TRI-Reagenz können ebenfalls mit dem Direct-zol-Miniprep-Kit von Zymo Research extrahiert werden.[5] Bei dieser Methode wird die Phasenseparation durch Chloroform und 1-Brom-3-chlorpropan übersprungen.[6]
TRIzol ist lichtsensitiv und wird oft in dunklen Glasbehältern bei Raumtemperatur gelagert. TRIzol ist pinkfarben mit einem Phenolgeruch.
Gefahren
[Bearbeiten | Quelltext bearbeiten]Aufgrund des Phenols und des Chloroforms ist bei der Handhabung Sicherheit geboten. TRIzol kann zu Verätzungen, permanenten Narben und Nierenschäden führen. TRIzol ist im Sicherheitsdatenblatt der Hersteller als oral, dermal sowie bei Inhalation akut toxisch eingestuft und kann zu Hautkorrosion/Irritation und schweren Augenschäden führen.[7] Experimente mit TRIzol sollten unter dem Abzug mit Schutzkittel, Nitrilhandschuhen und einer Plastikschürze durchgeführt werden.[8] TRIzol-Müll darf nicht mit Bleichmitteln oder Säuren gemischt werden: das Guanidiniumthiocyanat bildet damit stark toxische Gase.[8]
Einzelnachweise
[Bearbeiten | Quelltext bearbeiten]- ↑ Total RNA isolation: Trizol vs RNeasy. In: www.bioastrum.com. Abgerufen am 18. August 2021 (englisch).
- ↑ P Chomczynski, N Sacchi: Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction. In: Anal. Biochem. 162. Jahrgang, Nr. 1, April 1987, S. 156–9, doi:10.1016/0003-2697(87)90021-2, PMID 2440339 (englisch).
- ↑ RNA isolation. In: Cell Analysis Facility. Archiviert vom am 18. August 2021; abgerufen am 18. August 2021 (englisch).
- ↑ Evaluation of optimal RNA extraction method from human carotid atherosclerotic plaque. - Biospecimen Research Database. In: brd.nci.nih.gov. Abgerufen am 18. August 2021 (englisch).
- ↑ Direct-zol RNA Microprep Kits. (englisch).
- ↑ Patent EP2770056B1: Nukleinsäurereinigung. Angemeldet am 17. Juli 2013, veröffentlicht am 31. Mai 2017, Anmelder: Zymo Res Corp, Erfinder: Stanislav Forman, Xiyu Jia.
- ↑ TRIZOl MDS. (englisch).
- 1 2 Sicherheitsdatenblatt der Firma Thermo Fisher Scientific. Thermo Fisher Scientific, 25. Juni 2024, abgerufen am 1. April 2026.
